)アジ化ナトリウム(NaN3:和光純薬工業
)9-アミノアクリジン塩酸塩(ACR:ALDRICH社)
2-アミノアントラセン(2-AA:和光純薬工業
)
検定菌として，Salmonella typhimurium(TA100，TA98，TA1535，TA1537)およびEscherichia coli (WP2 uvrA)の5菌株を用い，用量設定試験の結果をもとに，本試験ではS9 mix無添加群のWP2 uvrAで9.77〜625 μg/plateの7用量，同群のその他の試験菌株ならびにS9 mix添加群のTA98で9.77〜313 μg/plateの6用量，S9 mix添加群のTA100で9.77〜625 μg/plateの7用量，同群のTA1535，TA1537ならびにWP2 uvrAで19.5〜1250 μg/plateの7用量で試験を実施した．
その結果，S9 mix無添加群および添加群のいずれにおいても，溶媒対照に比べ復帰突然変異コロニー数の明確な増加は認められなかった．
以上の結果より，本試験条件下ではブチルメタクリラートは，変異原性を有しない(陰性)と結論した．
ネズミチフス菌は昭和58年9月9日にカリフォルニア大学のB.N. Ames教授から，また，大腸菌については昭和58年3月16日に国立医薬品食品衛生研究所から分与を受けた．平成9年2月12日に菌株の特性検査を実施し，本試験に用いた菌株が規定の特性を保持していることを確認した．
各菌株の菌懸濁液はジメチルスルホキシド(DMSO: MERCK社)を添加した後，凍結保存用チューブに0.2 mLずつ分注した．これを液体窒素を用いて凍結し，超低温フリーザーに-80℃で保存した．
製のテスメディアAN培地を購入し，試験に用いた．本プレートは，Vogel-Bonnerの最少培地Eを含む水溶液(0.02 %硫酸マグネシウム・7水塩，0.2 %クエン酸・1水塩，1 %リン酸二カリウム・無水塩，0.192 %リン酸一アンモニウム，0.066 %水酸化ナトリウム〔いずれも最終濃度〕)に2 %のグルコース(和光純薬工業)と1.5 %の寒天(OXOID社:No.1)を加え，30 mLをシャーレに分注したものである．
)-0.5 mM D-ビオチン(関東化学)水溶液を1容量加え，大腸菌を用いる試験の場合，0.5 mM L-トリプトファン(関東化学)水溶液を同じく1容量加え用いた．
)を用い，37℃で6時間振盪(往復振盪:120回/分)培養し，試験に使用した．
製S9 mixを試験に使用した．S9 mix中のS9は誘導剤としてフェノバルビタールおよび5,6-ベンゾフラボンを投与したSprague-Dawley系雄ラットの肝臓から調製されたものである．S9 mixの組成を以下に示す．
| 成 分 | S9 mix 1 mL中の量 |
| S9 | 0.1 mL |
| MgCl2 | 8 μmol |
| KCl | 33 μmol |
| G-6-P | 5 μmol |
| NADPH | 4 μmol |
| NADH | 4 μmol |
| リン酸緩衝Na-液(pH 7.4) | 100 μmol |
| 精製水 | 残 量 |
から提供された被験物質を使用した．被験物質は，使用時まで室温で保管した．試験終了後，被験物質提供元において残余被験物質を分析した結果，安定性に問題はなかった．
従って，本試験においてはS9 mix無添加群のWP2 uvrAで625 μg/plate，同群のその他の試験菌株ならびにS9 mix添加群のTA98で313 μg/plate，S9 mix添加群のTA100で625 μg/plate，同群のTA1535，TA1537ならびにWP2 uvrAで1250 μg/plateを最高用量とし，それぞれ6〜7用量(公比2)を設定した．
)))
))を用いた．独立して試験を2回実施した．
なお，統計学的手法を用いた検定は実施しなかった．
なお，類縁化合物であるメタクリル酸tert-ブチルエステル３），メタクリル酸(2-ヒドロキシプロピル)エステル４）およびメタクリル酸2-ヒドロキシエチルエステル５）については，Salmonella typhimurium TA100，TA1535，TA98，TA1537およびEsherichia coli WP2 uvrAを用いた復帰突然変異試験で陰性と報告されている．
| 1) | D.M. Maron and B.N. Ames, Mutat. Res., 113, 173(1983). |
| 2) | M.H.L. Green and W.J. Muriel, Mutat. Res., 38, 3(1976). |
| 3) | 西富 保，化学物質毒性試験報告，4，499(1996)． |
| 4) | 澁谷 徹，化学物質毒性試験報告，4，579(1996)． |
| 5) | 澁谷 徹，化学物質毒性試験報告，5，543(1997)． |
| 連絡先 | |||
| 試験責任者： | 中嶋 圓 | ||
| 試験担当者： | 板倉真由実，植田ゆみ子 | ||
| 財団法人 食品農医薬品安全性評価センター | |||
| 〒437-1213 静岡県磐田郡福田町塩新田字荒浜582-2 | |||
| Tel 0538-58-1266 | Fax 0538-58-1393 | ||
| Correspondence | ||||
| Authors: | Madoka Nakajima(Study director) Mayumi Itakura, Yumiko Ueta | |||
| Biosafety Research Center, Foods, Drugs and Pesticides(An-pyo Center) | ||||
| 582-2 Shioshinden Aza Arahama, Fukude-cho, Iwata-gun, Shizuoka, 437-1213, Japan | ||||
| Tel +81-538-58-1266 | Fax +81-538-58-1393 | |||