アセナフテンのラットを用いる単回経口投与毒性試験

Single Dose Oral Toxicity Test of Acenaphthene in Rats

要約

アセナフテンをCrj:CD(SD)系雌雄ラットに単回経口投与し，その毒性を検討した．投与量は，雌雄とも1000および2000 mg/kgの2用量とし，対照群には媒体(0.5%メチルセルロース水溶液)を投与した．

死亡例は雌雄いずれの群においても認められず，LD50値は2000 mg/kg以上であった．一般状態の観察，体重推移および剖検では，雌雄ともに被験物質投与による変化は認められなかった．

方法

1．被験物質および被験液の調製

被験物質アセナフテンは，分子量154.22，融点94℃，沸点279℃の淡黄色結晶で，水に不溶，エタノールおよびメタノールにやや溶けやすく，クロロホルム，トルエンおよびベンゼンに溶けやすい．本試験にはロット番号709S4016(関東化学(株)製)，純度99.9%のものを用いた．なお，投与終了後の残余被験物質について分析を行った結果，使用期間中は安定であったことが確認された．

投与容量が10 ml/kg体重となるよう，0.5%メチルセルロース水溶液に懸濁して10および20%(w/v)懸濁液を調製した．0.2〜20%(w/v)懸濁液は，室温で1日間および冷蔵(約4℃)・遮光(褐色ガラス瓶)で8日間まで安定であったことから，被験液は投与日の4日前に調製し，褐色ガラス瓶に入れて使用時まで冷蔵庫(約4℃)に保存した．また，本投与に用いた各濃度液について当施設で測定した結果，いずれも濃度は適正でかつ均一であった．

2．試験動物および飼育条件

5週齢のCrj:CD(SD)系SPFラットを日本チャールス・リバー(株)から購入し，当所で約1週間検疫・馴化飼育した後，健康な動物を選び6週齡で試験に供した．投与日の体重範囲は雄で163〜177 g(平均値:170.3 g)，雌で 136〜146 g(平均値:141.1 g)であった．

動物は，投与3日前の体重により層別化し，無作為抽出法により各群の平均体重ができるだけ均等となるように割りつけた．

動物は，温度23±3℃，相対湿度50±20%，換気回数1時間当たり10〜15回，照明1日12時間の飼育室で，金属製網ケージに2〜3匹ずつ収容し，固型飼料(放射線滅菌CRF-1，オリエンタル酵母工業(株))および飲料水(水道水)を自由に摂取させて飼育した．

3．投与量および投与方法

500，1000および2000 mg/kgを1群雌雄各3匹のラットに投与した予備試験では，雌雄いずれの投与群でも死亡はみられなかった．したがって，本試験では雌雄ともに1000および2000 mg/kgの2用量群を設定し，これに対照群を加えて計3群を使用した．

動物は，投与前に約16時間絶食させたのち，所定濃度の被験液を10 ml/kg体重の容量で，金属製胃ゾンデを用いて1回強制経口投与した．対照群には溶媒(0.5%メチルセルロース溶液)を同様に投与した．1群の動物数は雌雄とも5匹とした．なお，投与後の給餌は投与6時間後に実施し，給水は投与に関係なく継続して行った．

4．検査項目

1)　一般状態および生死の観察

投与後6時間までは頻繁に，その後は1日1回，14日間にわたって実施した．

2)　体重測定

投与直前に体重を測定し，これを投与液量の算出基準にした．さらに，投与後1，2，3，7，10および14日に体重を測定した．

3)　病理学検査

14日間の観察期間終了後にエーテル深麻酔下で放血致死させ，体外表の観察を行った後，頭部，胸部，腹部を含む全身の器官・組織の異常の有無を肉眼的に観察した．

結果

1．死亡状況およびLD50値

雌雄ともに死亡はみられず，LD50値は2000 mg/kgを上回ると推定された．

2．一般状態

いずれの動物にも異常はみられなかった．

3．体重

各投与群の体重は，対照群とほぼ同様に推移した．

4．剖検

いずれの動物にも異常は認められなかった．

考察

雌雄ともに，いずれの投与群にも死亡はみられず，LD50値は2000 mg/kgを超えると推定された．また，一般状態，体重および剖検において被験物質投与による変化はみられなかったことから，ラットにおけるアセナフテンの経口投与時の急性毒性は極めて弱いことが示唆された．

連絡先
試験責任者：榎並倫宣
試験担当者：柳沢哲夫，沼田弘明
(株)ボゾリサーチセンター　御殿場研究所
〒412　静岡県御殿場市かまど1284
Tel.0550-82-2000Fax.0550-82-2379

Correspondence
Authors:Tomonori Enami(Study director)
Tetsuo Yanagisawa，Hiroaki Numata
Gotemba Laboratory，Bozo Research Center Inc.
1284, Kamado, Gotemba-shi, Shizuoka, 412, Japan
Tel.+81-550-82-2000Fax.+81-550-82-2379