トリフェニルクロロメタンのラットを用いる単回経口投与毒性試験

Single Dose Oral Toxicity Test of Triphenylchloromethane in Rats

要約

トリフェニルクロロメタンをCrj:CD(SD)IGS系雌雄ラットに単回経口投与し，その毒性を検討した．投与量は，雌雄とも2000 mg/kgの1用量とし，対照群には媒体(オリーブ油)を投与した．

死亡例は雌雄いずれの群においても認められず，LD50値は2000 mg/kg以上であった．一般常態の観察，体重推移及び剖検では，雌雄ともに被験物質投与による変化は認められなかった．

方法

1.　被験物質及び被験液の調製

被験物質トリフェニルクロロメタン(黒金化成(株)，愛知，ロット番号1038，純度99.5 %)は融点115 ℃，沸点310 ℃の白色〜微黄色結晶性粉末である．なお，投与終了後の残余被験物質について分析を行った結果，使用期間中は安定であったことが確認された．

被験物質は，投与容量が10 mL/kg体重となるようオリーブ油に懸濁して200 mg/mL懸濁液を調製した．調製は投与日の4日前に調製し，褐色ガラス瓶に入れて使用時まで冷蔵庫(約4 ℃)に保存した．なお，上記条件下での被験液の安定性は確認済である．また，投与に使用した被験液について測定した結果，適正濃度かつ均一であった．

2.　試験動物及び飼育条件

5週齢のCrj:CD(SD)IGS系SPFラットを日本チャールス・リバー(株)から購入し，7日間検疫・馴化飼育した後，健康な動物を選び6週齡で試験に供した．1群の動物数は雌雄とも5匹とし，投与日の体重範囲は雄で154〜163 g(平均値:158.2 g)，雌で118〜132 g(平均値:126.9 g)であった．

動物は，投与前日の体重により層別化し，無作為抽出法により各群の平均体重ができるだけ均等となるように割りつけた．

動物は，温度23 ± 3 ℃，相対湿度50 ± 20 %，換気回数1時間当たり10〜15回，照明1日12時間の飼育室で，金属製網ケージに1〜3匹ずつ収容し，固形飼料(放射線滅菌CRF-１，オリエンタル酵母工業(株))及び飲料水(水道水)を自由に摂取させて飼育した．

3.　投与量及び投与方法

250，500，1000及び2000 mg/kgを1群雌雄各3匹のラットに投与した予備試験では，雌雄いずれの投与群でも死亡はみられなかった．したがって，本試験では雌雄ともに2000 mg/kgの1用量群を設定し，これに対照群を加えて計2群を使用した．

動物は，投与前に約16時間絶食させたのち，200 mg/mLの濃度の被験液を10 mL/kg体重の容量で，金属製胃ゾンデを用いて1回強制経口投与した．対照群には溶媒(オリーブ油)を同様に投与した．なお，投与後の給餌は投与6時間後に実施し，給水は投与に関係なく継続して行った．

4.　検査項目

観察期間は14日間とし，投与後6時間までは頻繁に，その後は1日1回一般状態及び生死の観察を行った．体重は投与直前に測定し，これを投与液量の算出基準にした．さらに，投与後1，2，3，7，10及び14日に体重を測定した．観察期間終了後，全動物をエーテル深麻酔下で放血致死させ，体外表の観察を行った後，頭部，胸部，腹部を含む全身の器官・組織の異常の有無を肉眼的に観察した．

結果

1.　死亡状況及びLD50値

雌雄ともに死亡はみられず，LD50値は2000 mg/kgを上回ると推定された．

2.　一般状態

いずれの動物にも異常はみられなかった．

3.　体重

各投与群の体重は，対照群とほぼ同様に推移した．

4.　剖検

いずれの動物にも異常は認められなかった．

考察

雌雄ともに，被験物質投与群では死亡はみられず，LD50値は2000 mg/kgを超えると推定された．また，一般状態，体重及び剖検において被験物質投与による変化はみられなかったことから，ラットにおけるトリフェニルクロロメタンの経口投与時の急性毒性は極めて弱いことが示唆された．

連絡先
試験責任者：榎並倫宣
試験担当者：鷹野正生，津田敏治
(株)ボゾリサーチセンター　御殿場研究所
〒412-0039　静岡県御殿場市かまど1284
Tel 0550-82-2000Fax 0550-82-2379

Correspondence
Authors:Tomonori Enami (Study director)
Masao Takano, Toshiharu Tsuda
Gotemba Laboratory, Bozo Research Center Inc.
1284, Kamado, Gotemba-shi, Shizuoka, 412-0039, Japan
Tel +81-550-82-2000Fax +81-550-82-2379