2-tert-ブトキシエタノールのラットを用いる単回経口投与毒性試験

Single Dose Oral Toxicity Test of 2-tert-Butoxyethanol in Rats

要約

既存化学物質の安全性点検事業の一環として，2-tert-ブトキシエタノールについて，雌雄のSD系ラット(1群雌雄各5匹)に1回経口投与した時の毒性を検討した．投与用量は500，1000および2000 mg/kgとし，また，媒体を投与する対照群を設けた．

投与の結果，いずれの被験物質投与群においても死亡例はみられなかった．一般状態観察において，投与日には着色尿(赤色)が被験物質投与群の雌雄全例で，歩行異常が1000および2000 mg/kg群の雌雄，自発運動の低下および腹臥位が2000 mg/kg群の雌雄，さらに呼吸不整が2000 mg/kg群の雄で認められた．投与の翌日には耳介，四肢あるいは眼球が蒼白し貧血様の変化が被験物質投与群の雌雄全例でみられた．体重推移および剖検の結果には，いずれの被験物質投与群においても異常はみられなかった．

2-tert-ブトキシエタノールの半数致死量(LD50値)は，雌雄ともに2000 mg/kg以上と推定した．

方法

1.　被験物質

2-tert-ブトキシエタノール[丸善石油化学(株)(東京)，ロット番号00111D2，純度99.98 wt%]は，融点-120 ℃以下，沸点152 ℃，蒸気圧213.3 Pa(20 ℃)，分配係数Log Pow 0.36，通常の取り扱いでは安定，水およびアルコールに可溶，常温で無色透明液体である．被験物質は冷暗所で保存し，試験期間中安定であることを確認した．投与液の調製は投与前日に行い，被験物質を精製水で溶解調製させた．なお，投与開始前に投与液中の被験物質の均一性および調製後8日間の安定性を確認した．また，投与液中の被験物質濃度が設定値どおりであることを確認した．

2.　試験動物

日本チャールス・リバー(株)より入手した雌雄のSD系ラット[Crj:CD(SD)IGS，SPF]を6日間検疫・馴化後，試験に供した．投与前日に，体重層別化無作為抽出法により，各群の平均体重がほぼ均一となるように1群あたり雌雄各5匹に振り分けた．投与日の週齢は5週齢，体重範囲は雄が125〜151 g，雌が105〜124 gであった．

検疫・馴化期間を含む全飼育期間を通して，温度22 ± 2 ℃，相対湿度55 ± 15 %，換気約12回/時，照明12時間/日(7:00-19:00)に自動調節した飼育室を使用した．

動物は実験動物用床敷(ベータチップ，日本チャールス・リバー(株))を敷いたポリカーボネート製ケージに5匹(同性)ずつ収容し，飼育した．動物には，実験動物用固型飼料(MF,オリエンタル酵母工業(株))と，5 μmのフィルター濾過後，紫外線照射した水道水を自由に摂取させた．

3.　投与量および投与方法

投与経路は経口，投与回数は1回とした．投与前日より約17時間絶食させたラットに，胃ゾンデを用いて強制経口投与し，投与後約3時間は飼料を与えなかった．

投与用量は，予備検討の結果(500，1000および2000 mg/kg)，いずれの用量群においても死亡例はみられなかったが，1000 mg/kg以上の用量群では，自発運動の低下および歩行異常が認められた．このため，本試験の用量は雌雄ともに2000 mg/kgを最高用量とし，以下公比2で1000および500 mg/kgの3用量を設定した．この他に媒体のみを投与する対照群を設けた．投与液量は10 mL/kgとし，投与直前の体重に基づいて算出した．

4.　観察および検査項目

1)　一般状態

投与日は投与後5，30分，1，3および6時間の5回，以後は1日1回14日間にわたって生死および一般状態を観察した．

2)　体重

全例について投与直前，第4，8および15日に上皿電子天秤を用いて測定した．

3)　病理検査

観察終了後にチオペンタール・ナトリウムの腹腔内投与による麻酔下で腹大動脈から放血し，安楽死させた後剖検した．なお，肉眼的異常部位は10 %中性リン酸緩衝ホルマリン液に保存した．

4)　半数致死量(LD50値)の算出

死亡例がみられなかったことから，半数致死量(LD50値)の算出は行わなかった．

結果

1.　一般状態

投与日には各用量群ごとに次の所見が認められた．500 mg/kg群では着色尿(赤色)が投与後3時間に雄3例雌全例，6時間後に雌雄全例で認められた．1000 mg/kg群では歩行異常が投与後30分に雌雄各2例で，着色尿(赤色)が投与後3時間から6時間に雌雄全例で認められた．2000 mg/kg群では自発運動の低下が投与後5分に雄1例，30分に雄3例雌1例，1時間に雄4例雌1例，3時間に雌雄各1例で，歩行異常が投与後5分に雄全例雌2例，30分に雄3例雌2例，1時間に雄全例雌1例，3時間に雄4例雌1例，6時間に雄2例雌1例で，呼吸不整が投与後30分に雄1例で，腹臥位が投与後30分に雄2例雌1例で，着色尿(赤色)が投与後3時間から6時間に雌雄全例で認められた．

第2日には耳介，四肢あるいは眼球が蒼白し貧血様の変化が被験物質投与群全例で認められた．500 mg/kg群の全例と1000および2000 mg/kg群の一部の動物は第3日には回復したが，1000 mg/kg群の雄1例雌2例は第4日，2000 mg/kg群の雌雄各1例は第5日，2000 mg/kg群の雌1例は第6日にそれぞれ回復した．

2.　体重

雌雄ともいずれの群においても対照群と同様の推移を示した．

3.　剖検所見

脾臓の変形が1000 mg/kg群の雄1例にみられたが，1例のみの発現で用量に関係ないことから，偶発所見と判断した．その他に異常はみられなかった．

考察

2-tert-ブトキシエタノールを雌雄のラットに0，500，1000および2000 mg/kgの用量で1回経口投与した．その結果，雌雄とも被験物質投与群の全例で着色尿(赤色)，および耳介，四肢あるいは眼球が蒼白した貧血様の変化が認められた．1000 mg/kg以上の用量群では歩行異常，2000 mg/kg群ではさらに自発運動の低下を主徴とする急性症状が発現したが，死亡例はみられなかった．このことから2-tert-ブトキシエタノールの半数致死量(LD50値)は，雌雄ともに2000 mg/kg以上と推定した．

連絡先
試験責任者：星野信人
試験担当者：岩井真弓，鈴木美江
(株)三菱化学安全科学研究所鹿島研究所
〒314-0255　茨城県鹿島郡波崎町砂山14
Tel 0479-46-2871Fax 0479-46-2874

Correspondence
Authors:Nobuhito Hoshino(Study director)
Mayumi Iwai, Yoshie Suzuki
Mitsubishi Chemical Safety Institute Ltd., Kashima Laboratory
14 Sunayama, Hasaki-machi, Kashima-gun, Ibaraki, 314-0255, Japan
Tel +81-479-46-2871Fax +81-479-46-2874