コハク酸二ナトリウム六水和物のラットを用いる単回経口投与毒性試験

Single Dose Oral Toxicity Test of Disodium succinate hexahydrate in Rats

要約

既存化学物質の安全性を評価するため，コハク酸二ナトリウム六水和物の0および2000 mg/kgを雌雄のCrj:CD(SD)系ラットに単回経口投与し，急性毒性を検討した．

死亡は雌雄いずれの動物にも認められなかった．一般状態の観察では観察期間を通じて雌雄ともに異常は認められなかった．体重は投与後7および14日の測定において雌雄ともに前回の測定値と比較して増加していた．観察期間終了時の剖検では雌雄ともに異常は認められなかった．

以上の結果から，コハク酸二ナトリウム六水和物の雌雄ラットにおけるLD50値はともに2000 mg/kg以上と推定された．

方法

1.　被験物質

コハク酸二ナトリウム六水和物(日本触媒製造(株)(大阪)，純度99.9 %，Lot No. 9P01B)は白色結晶性の粉末であり，使用時まで室温の被験物質保管庫に密閉容器で保管した．本ロットは投与期間中安定であったことを確認した．

2.　供試動物

5週齢のCrj:CD(SD)系ラット(SPF)雌雄各14匹を日本チャールス・リバー(株)(神奈川)から購入した．動物は検収後，試験環境に馴化し，6週齢で投与した．

3.　飼育

動物は，温度23.2〜24.4 ℃，湿度50〜64 %，照明時間12時間(午前7時点灯，午後7時消灯)に制御された飼育室で，ステンレス製網目飼育ケージに5匹ずつ収容して飼育した．動物には，オリエンタル酵母工業(株)製造の固型飼料MFおよび水道水を自由に摂取させた．

4.　用量設定理由

本試験に先立って実施した予備試験において500，1000および2000 mg/kg群のいずれにおいても死亡は認められなかった．従って本試験の用量は雌雄ともにOECDガイドライン「急性経口」で上限用量として指定されている2000 mg/kgの1用量とし，さらに雌雄それぞれに媒体対照群を設置した．

5.　群分け

動物はあらかじめ体重によって層別化し，無作為抽出法により雌雄ともに各群5匹ずつ振り分けた．投与時の体重は，雄が167〜177 g，雌が127〜143 gであった．

6.　投与液の調製および投与方法

被験物質は200 mg/mLの濃度となるように蒸留水(注射用蒸留水:(株)大塚製薬工場，徳島，Lot No. 9D90)に溶解した．投与液の調製は用時に行った．投与液中の被験物質濃度(全濃度:n=3)を，調製後速やかに測定した結果，適切に調製されていたことが確認された．投与容量は体重100 gあたり1 mLとし，個体別に測定した体重に基づいて投与量を算出した．

投与回数は1回とし，投与前16時間絶食させた動物に胃ゾンデを用いて強制経口投与した．給餌は被験物質投与後3時間に行った．

7.　一般状態の観察

中毒症状および生死の観察は，投与6時間までは1時間毎に，投与翌日からは1日2回，14日間にわたって実施した．

8.　体重

すべての動物の体重を投与直前，投与後7および14日に測定した．

9.　病理学検査

観察終了時にすべての動物をエーテル麻酔後放血安楽死させ解剖し，肉眼的病理所見を記録した．

結果

1.　死亡率およびLD50値

雌雄ともにいずれの投与群にも死亡動物は認められなかった．従って，LD50値は雌雄ともに2000 mg/kg以上と推定された．

2.　一般状態

観察期間を通じていずれの動物にも一般状態に異常は認められなかった．

3.　体重

投与後7および14日の測定ですべての動物の体重が前回の測定値と比較して増加していた．

4.　病理所見

観察期間終了時の解剖でいずれの動物にも異常は認められなかった．

考察

コハク酸二ナトリウム六水和物についてラットを用いる急性経口毒性試験を実施した．その結果，一般状態に異常はみられず，死亡動物も認められなかった．また，観察期間終了時の病理解剖においても異常は認められなかった．

以上の結果から，コハク酸二ナトリウム六水和物の雌雄ラットにおけるLD50値はともに2000 mg/kg以上と推定された．

連絡先
試験責任者：藤島　敦
試験担当者：保母真由美
(財)食品農医薬品安全性評価センター
〒437-1213　静岡県磐田郡福田町塩新田582-2
Tel 0538-58-1266Fax 0538-58-1393

Correspondence
Authors:Atsushi Fujishima(Study director)
Mayumi Hobo
Biosafety Research Center, Foods, Drugs and Pesticides(An-Pyo Center)
582-2 Shioshinden, Fukude-cho, Iwata-gun, Shizuoka, 437-1213, Japan
Tel +81-538-58-1266Fax +81-538-58-1393