微生物を用いた3−メトキシベンゼナミンの変異原性試験

Mutagenicity test of 3-Methoxybenzenamine with
the Salmonella/microsome Assay (Ames Test)

要約

3−メトキシベンゼナミンについてSalmonella typhimurium TA100、TA98、TA97、TA102を用いて遺伝子突然変異試験を行った。代謝活性化にはPCBで処理したBalb/cマウス肝より調製したS9（オリエンタル酵母工業 (株) ）を用いた。最高濃度5 mg/plateまで試験した結果、3−メトキシベンゼナミンは代謝活性化した場合のみに、TA98に対し変異原性を示した。

緒言

S.typhimurium TA株を用いる変異原性試験は最も汎用されている変異原性試験の一つでであり、求電子的にDNAに作用する発癌物質の多くが、この試験で陽性結果を示すことが報告されている。既存化学物質毒性試験の一環として、3−メトキシベンゼナミンについて微生物を用いる遺伝子突然変異試験を行い、変異原性の有無を調べた。

方法

微生物を用いる遺伝子突然変異試験は、S.typhimurium TA100（塩基置換型変異原検出用）、TA98、TA97（フレ−ムシフト型変異原検出用）、およびTA102（架橋型，酸化型変異原検出用）の4菌株を用い、37℃、20分間のプレインキュベーションを含むエームス法で行っ た1, 2）。S9はPCB処理した雄Balb/cマウス肝より調製したものを、オリエンタル酵母工業株式会社より購入した。S9mix（0.5ml）中には、S9（50 μl）、G6P（2.5μmol）、NADPH（2μmol）、NADH（2μmol）、MgCl2（4μmol）、KCl（16.5μmol）、リン酸ナトリウム（pH7.4, 40 μmol）が含まれている。被験物質はdimethyl sulfoxide（DMSO）に溶解し、最高濃度5 mg/plate、8段階濃度をとって試験を行った。濃度に依存して誘発復帰変異コロニ−数が上昇し、しかもその数が自然復帰コロニ−数の2倍を越えた場合を陽性とした。陽性対照としては、−S9 mixの条件下ではTA100、TA98にはAF-2、TA 102にmitomycin C（MMC）、TA97にICR-191を、+S9 mixの条件下では、いずれの株に対しても2-aminoanthracene（2AA）を用いた。

結果

微生物による突然変異試験の結果をTable1に示す。今回供試された被験物質3−メトキシベンゼナミン（東京化成工業 (株)、純度99%）は、TA98に対しS9 mix存在下で変異原性を示した。

考察

3−メトキシベンゼナミンの変異原性については、4-Methoxybenzenamineや2-Mthoxybenzenamineに比べて報告が非常に少ない。Haworthら3）はPCB処理したSprague-Dawleyラットと雄Syrianハムスター肝より調製したS9を用いて、S.typhimurium TA100、TA98、TA1535、TA1537に対し3,333ug/plateまで調べた結果、陰性と報告している。我々の実験結果と異なる結果を示したのは、使用したS9の違いによるものと考えられる。Thompsonら4）はbacteria mutationおよびhepatocyte UDSともに陰性と報告している。なおGallowayら5）はS9mix非条件下でchromosome aberrationならびにsister chromatid exchange陽性と報告している。3−メトキシベンゼナミンの安全性については他の試験系も含めた総合的判断が望まれる。

文献

1)B. N. Ames, J. McCann and E. Yama-saki, Mutat. Res., 31, 347 (1975).
2)D. M. Maron and B. N. Ames, Mutat.Res., 113, 173 (1983)
3)S. Haworth, T. Lawlor, K. Mortelmans, W. Speck and E. Zeiger, Environ .Mutagen. 5 (Suppl. 1), 3-142 (1983).
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連絡先：
試験責任者祖父尼俊雄
国立衛生試験所安全性生物試験研究センタ−
変異遺伝部
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Correspondence:
Sofuni, Toshio
Division of Genetics & Mutagenesis,
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