エテニルトリメトキシシランを雌ラットに1回経口投与し，その毒性について検討した．投与量は，第1回試験は2000 mg/kg，第2回試験および第3回試験は300 mg/kgとした．媒体にはトウモロコシ油を用いた．使用動物数は各3例とした．

　死亡例は，2000mg/kg投与で投与後3日に2例に認められた．

　一般状態において，2000 mg/kg投与で下痢，肛門周囲の汚れおよび赤色尿がみられた．300 mg/kg投与では，下痢および肛門周囲の汚れがみられた．2000 mg/kg投与では，投与後1日に体重の低値がみられた．300 mg/kg投与では，体重推移に異常はみられなかった．剖検において，2000 mg/kg投与の死亡例で胸腺および脾臓の小型化がみられた．300 mg/kg投与では，剖検所見に異常はみられなかった．病理組織学検査において，2000 mg/kg投与の死亡例で胸腺に皮質の萎縮，脾臓に赤脾髄および白脾髄の萎縮がみられた．

　 以上の結果から，エテニルトリメトキシシランの急性毒性は，GHSのカテゴリー4に分類される．

1.　被験物質および媒体

　エテニルトリメトキシシランは，無色透明の液体で微臭があり，水に難溶(加水分解性あり)である[Lot No. 308595，含量:100 %，沸点:123℃，蒸気圧:2.7 kPa以下/25℃，揮発性:なし，融点:0℃以下，比重又は嵩比重:0.97(25℃)，信越化学工業(東京)]．入手後は，冷蔵・遮光の条件下で保管した．投与終了後に被験物質を分析し，使用期間中安定であったことを確認した．

　エテニルトリメトキシシランは，トウモロコシ油で所定濃度となるように溶解して調製した．20および200 mg/mLの調製液は，調製後，冷蔵および遮光の条件下で7日間保管後，さらに室温および遮光の条件下で6時間保管しても安定性に問題のないことが確認されている．投与検体は，用時調製とし，調製後6時間以内に使用した．

　投与に使用した投与検体中の被験物質濃度を測定した結果，被験物質含量に問題はなかった．

2.　使用動物および飼育条件

　7週齢のCrj:CD(SD)IGS雌ラット(SPF)を日本チャールス・リバーから購入した．入手した動物は，5日間の検疫期間およびその後2日間の馴化期間を設け，一般状態および体重推移に異常の認められなかった動物を群分けした．群分けは，第1回試験，第2回試験および第3回試験とも投与日にコンピュータを用いて無作為抽出法で行った．

　動物は，室温20〜24℃，湿度34〜65 %，明暗各12時間(照明:午前6時〜午後6時)，換気回数12回/時に維持された飼育室で飼育した．検疫・馴化期間中および群分け後とも，ステンレス製ケージを用いて個別飼育した．飼料は，固型飼料(CRF-1，オリエンタル酵母工業)を自由に摂取させた．ただし，投与前日の夕刻から投与までの約18時間30分と投与後約6時間まで絶食した．飲料水は，水道水を自由に摂取させた．ただし，群分け時から投与後約6時間までは絶水した．

3.　投与経路，投与方法および投与量

　投与経路は，経口投与を選択した．投与に際しては，金属製経口胃ゾンデを取り付けたポリプロピレン製ディスポーザブル注射筒を用いて，強制経口投与した．投与液量は，投与直前に測定した体重を基準として10 mL/kgで算出した．投与回数は1回とした．投与日の週齢は8週齢であり，体重範囲は173〜186 gであった．

　エテニルトリメトキシシランのラット経口投与によるLD50値は11300 mg/kgとの情報がある1)．従って，OECD Test Guideline 423で最高用量とされている2000 mg/kgを第1回試験の投与量とした．第1回試験の2000 mg/kg投与で2例が死亡したため，300 mg/kgを第2回試験の投与量とした．第2回試験の300 mg/kg投与で死亡例が認められなかったため，300 mg/kgを第3回試験の投与量とした．使用動物数は各3例とした．

4.　観察および検査項目

　1)　観察期間

　投与後14日間とした．

　2)　一般状態

　投与日は投与後6時間(投与直後〜投与後30分，投与後2，4および6時間)まで，投与翌日からの観察期間中は1日1回，一般状態および死亡の有無を観察した．

　3)　体重測定

　投与日ならびに投与後1，3，7，10および14日に測定した．

　4)　剖検

　死亡動物は，速やかに剖検した．生存動物は，観察期間終了時にジエチルエーテル麻酔下で腹大動脈から放血致死させた後に剖検した．

　5)　病理組織学検査

　投与後24時間以上生存した死亡例の剖検において，異常の認められた胸腺および脾臓は，パラフィン包埋標本を作製後，HE染色組織標本を作製し，病理組織学検査を実施した．

5.　統計解析

　LD50値は概略の範囲を推定した．

　体重は，各群で平均値および標準偏差を算出した．

1.　死亡状況，LD50値および一般状態(Table 1)

　死亡例は，第1回試験の2000 mg/kg投与で投与後3日に2例に認められた．第2回試験および第3回試験の300 mg/kg投与では，死亡例は認められなかった．以上の結果から，エテニルトリメトキシシランのLD50値は，300 mg/kgと2000 mg/kgの間にあると推定される．

　一般状態において，第1回試験の2000 mg/kg投与で投与後4時間に下痢および肛門周囲の汚れが1例，投与後1日に赤色尿が3例にみられた．第2回試験の300 mg/kg投与では，投与後2時間に下痢および肛門周囲の汚れが2例，投与後6時間に肛門周囲の汚れが1例にみられた．第3回試験の300 mg/kg投与では，異常はみられなかった．

2.　体重

　第1回試験の2000 mg/kg投与では，投与後1日に体重の低値がみられたが，投与後3日以降の体重は順調に推移した．第2回試験および第3回試験の300 mg/kg投与では，体重は順調に推移した．

3.　剖検

　第1回試験の2000 mg/kg投与による死亡例では，胸腺および脾臓の小型化が2例にみられた．

　第1回試験の2000 mg/kg投与による生存例ならびに第2回試験および第3回試験の300 mg/kg投与による生存例では，異常はみられなかった．

4.　病理組織学検査

　第1回試験の2000 mg/kg投与による死亡例では，胸腺に皮質の中等度の萎縮，脾臓に赤脾髄および白脾髄の中等度の萎縮が2例にみられた．

考察

　エテニルトリメトキシシランの急性毒性は，GHSのカテゴリー4に分類される．

　エテニルトリメトキシシランの2000 mg/kg投与により，下痢，肛門周囲の汚れおよび赤色尿，剖検で胸腺および脾臓の小型化，病理組織学検査で胸腺に皮質の萎縮ならびに脾臓に赤脾髄および白脾髄の萎縮が認められたことから，エテニルトリメトキシシランによる全身状態の悪化により死に至ったと考えられる．

1) 信越化学工業，未発表

Correspondence
	Authors:	Tadakazu Furuhashi(Study director) Takashi Fujimura, Kazuyoshi Naito, Ken-ichi Yoshijima, Tadashi Ito, Hitoshi Kimura
	Hashima Laboratory, Nihon Bioresearch Inc.
	6-104, Majima, Fukuju-cho, Hashima, Gifu, 501-6251, Japan
	Tel +81-58-392-6222	Fax +81-58-392-1284