トリプロピレングリコールの
ラットを用いる単回経口投与毒性試験

Single Dose Oral Toxicity Test of Tripropyleneglycol in Rats

要約

　既存化学物質の毒性学的性質を評価するために，トリプロピレングリコールを雌雄ラットに 1 回経口投与し，その毒性について検討した．投与量は 2000 mg/kgを最高用量とし，以下 1000 および 500 mg/kgとした．対照として，媒体の蒸留水投与群を設けた．

　死亡発現はなく，異常症状は観察されなかった．LD50 値は，雌雄ともに 2000 mg/kg以上であった．体重は，各投与群とも対照群とほぼ同様の推移を示した．剖検では，いずれの例とも著変はみられなかった．

方法

１.被験物質，媒体および投与検体液

　被験物質のトリプロピレングリコールは，分子式：C9H20O4 , 分子量：192.29，沸点：268℃，比重（25 ℃）：1.019，粘性率（25 ℃）：56.2 cp，引火点：140 ℃で，水にきわめて溶けやすい粘性の液体である［Lot No.040810，製造元：旭電化工業（株），純度：98 ％以上］．投与終了後に残余被験物質の一部を製造元に送付して分析した結果，純度は規格値内であり，使用期間中の安定性が確認された．媒体として，蒸留水（大塚注射用水）を用いた．

　投与検体液は，被験物質を蒸留水に用時溶解して調製した．

２.使用動物および飼育条件

　4 週齢の Sprague-Dawley 系雌雄ラット［（SPF），Crj：CD（SD）］を日本チャールス・リバー（株）から購入し，5日間の検疫期間およびその後 3日間の馴化期間を設け，一般状態および体重推移に異常の認められない雌雄各20匹の動物を群分けして試験に用いた．群分けは，コンピュータを用いて体重を層別に分けた後に，無作為抽出法により各群の平均体重および分散がほぼ等しくなるように投与日に行った．

　動物は，室温 20〜24℃，湿度 40〜70％，明暗各12時間，換気回数 12回／時に設定した飼育室で飼育した．検疫・馴化期間中および絶食期間中はステンレス製懸垂式ケージを用いて1ケージあたり5匹までの群飼育とし，群分け後はステンレス製五連ケージを用いて個別飼育した．

　飼料は固型飼料［CRF-1，オリエンタル酵母工業（株）］を給餌器に入れ，自由に摂取させた．ただし，投与前日の夕刻から投与までの約19時間と，投与後約 6 時間まで絶食させ，その後に飼料を与えた．飲料水は，水道水を給水瓶を用いて自由に摂取させた．ただし，群分け時から投与後約 6 時間までは絶水させ，その後に飲料水を与えた．飼料および飲料水の検査の結果，いずれも試験成績は当試験施設で定めた基準値の範囲内であった．

３.投与経路，投与方法，群構成および投与量

　トリプロピレングリコールは，経口的に人に摂取される可能性が考えられたため，投与経路として胃ゾンデを用いた強制経口投与を選択した．投与液量は，投与直前に測定した体重を基準として，10 ml/kgで算出した．投与回数は 1 回とした．投与時の週齢は約 5 週齢，体重範囲は雄が 114〜121 g，雌が 94〜100 gであった．

　群構成は以下の如くとした．一群の動物数は，雌雄各 5 匹とした．

　投与量設定の理由：雄ラットを用いた予備試験の結果，OECD 毒性試験ガイドラインで限界用量とされている 2000 mg/kg投与においても死亡例はみられなかった．したがって，当試験では 2000 mg/kgを高用量とし，以下公比 2 で 1000 および 500 mg/kg群を設けた．対照として，被験物質と同一容量の媒体（蒸留水）を投与する群を設けた．

４.観察および検査項目

観察期間は，投与後14日間とした．

　一般状態および死亡の有無を，投与日は投与前および投与後6時間まで，投与翌日からの観察期間中は1日1回観察した．

　体重は，投与日（投与直前）および投与後 1，3，7，10 ならびに 14日の午前中に測定した．

　各動物とも，観察期間終了時にエーテル麻酔下で腹大動脈から放血致死させた後に剖検した．

５.統計学的方法

　LD50値は，観察期間中の死亡率から概略値を推定した．

　体重は，各群で平均値および標準偏差を算出した．有意差検定は対照群と被験物質投与各群の間で多重比較検定を用いて行い，危険率 5 ％未満を有意とした．すなわち，Bartlett 法による等分散性の検定を行い，等分散の場合には一元配置法による分散分析を行い，有意ならば対照群との群間比較を Dunnett 法により行った．一方，等分散と認められなかった場合は順位を利用した一元配置法による分析（Kruskal-Wallis の検定）を行い，有意ならば対照群との群間比較は順位を利用した Dunnett 法を用いて行った．

結果および考察

１.一般状態および死亡状況

　観察期間を通じて，いずれの例とも異常症状はみられなかった．

　雌雄とも，高用量の 2000 mg/kg群でも死亡発現はなかった．トリプロピレングリコールの LD50 値は，雌雄とも 2000 mg/kg以上であった．

２.体重推移

　雌雄の各投与群とも対照群とほぼ同様の推移を示し，有意差は認められなかった．

３.剖検所見

　雌雄各群とも，剖検で著変はみられなかった．

　以上のように，トリプロピレングリコールは OECD 毒性試験ガイドラインで限界用量とされている 2000 mg/kgの投与によって雌雄とも死亡発現はなく，一般状態の観察でも異常症状はみられなかった．また，体重推移に異常はなく，剖検でも著変はみられなかった．

　トリプロピレングリコールの LD50値は，雌雄とも 2000 mg/kg以上であった．

連絡先：
試験責任者：和田　浩
試験担当者：小林吉一，藤村高志，古橋忠和，山本明義
(株)日本バイオリサーチセンター羽島研究所
〒501-62　岐阜県羽島市福寿町間島 6-104
Tel 058-392-6222Fax 058-392-1284

Correspondence
Authors:Hiroshi Wada (Study director)
Yoshikazu Kobayashi,
Takashi Fujimura,
Tadakazu Furuhashi and Akiyoshi Yamomoto
Nihon Bioresearch Inc. Hashima Laboratory
6-104 Majima, Fukuju-cho, Hashima, Gifu, 501-62, Japan
Tel +81-58-392-6222Fax +81-58-392-1284