4-メトキシベンズアルデヒドのラットを用いる単回経口投与毒性試験

Single Dose Oral Toxicity Test of 4-Methoxybenzaldehyde in Rats

要約

4-メトキシベンズアルデヒドの1000および2000 mg/kgを1群5匹からなる5週齢の雄ラットに，雌ラット5匹には2000 mg/kgを単回経口投与した．媒体対照として雄5匹にコーン油を投与した．

雌雄の2000 mg/kg投与群で軽度な体重増加抑制が観察第2日にみられた．

一般状態および剖検所見に変化は認められなかった．

4-メトキシベンズアルデヒドのLD50値は，雌雄ともに2000 mg/kgを上回ると推定された．

方法

1.　被験物質

被験物質として，(株)日本触媒(神奈川)より提供された4-メトキシベンズアルデヒド(Lot No. W81015，純度99.9 %，無色透明の液体)を使用した．この化学物質は，香料，化粧石鹸，化学合成原料として用いられ，ラットにおける単回投与時のLD50値は1300(1110〜1540)mg/kgであることが報告されている1, 2)．受領物質は，使用時まで気密容器に入れて室温で保管した．なお試験終了後，残余被験物質を提供元で再分析し，被験物質が試験期間中安定であったことを確認した．

投与検体の調製は，各用量毎に被験物質を秤量し，所定濃度となるようにコーン油(Lot No. V8P7069，ナカライテスク(株)を加えて溶解し，投与時まで室温で保存した．なお，調製した0.4および20 w/v%のコーン油溶液中における被験物質は，室温・遮光条件下で8日間安定性があり，各投与検体の含量を測定した(100〜101 %)．

2.　使用動物および飼育方法

4週齢のSprague-Dawley系(Crj:CD(SD)IGS)雌雄ラットを，日本チャールス・リバー(株)筑波飼育センターから購入し，検疫と馴化を兼ねて8日間予備飼育した．試験には，予備飼育中の一般状態に異常が認められなかった雄15匹雌5匹を用いた．雄は検疫終了時の体重を基に体重別層化無作為抽出法により1群5匹からなる3群に分け，雌は無作為に5匹を選んで1群とした．投与開始時の週齢は雌雄ともに5週齢であり，体重は雄が131.3〜147.3 g，雌が115.2〜124.5 gであった．

全飼育期間を通じ，動物を金属製金網床ケージに1匹ずつ収容し，温度23〜25 ℃，湿度50〜65 %，換気回数約15回/時，照明12時間(7時〜19時点灯)に設定された飼育室で，固型飼料(CE-2，日本クレア(株)および水道水(秦野市水道局給水)を自由に摂取させて飼育した．

3.　投与量の設定および投与方法

投与量は，予備試験の結果を基に決定した．すなわち，被験物質の2000 mg/kgを5週齢の雌雄ラット各3匹に単回投与した結果，雄で排便量の減少が，同群の雌雄で体重増加抑制あるいは減少が認められたことから，雄では1000および2000 mg/kgの2用量を設定し，加えて媒体対照群としてコーン油を被験物質投与群と同容量投与する群を設けた．また，予備試験では明らかな性差は認められなかったことから，雌については，2000 mg/kgの1用量を設定した．

投与容量は体重1 kg当たり10 mLとし，投与液量は投与前約18時間絶食させた後，投与直前に測定した体重を基に算出し，ラット用胃管を用いて強制的に単回経口投与した．給餌は投与後約3時間に再開した．

4.　観察および検査

観察第1日(投与日)から14日間にわたって死亡の有無を確認し，各動物の一般状態を観察した．観察は投与日においては投与直後から1時間まで連続して行い，その後は投与後6時間まで約1時間間隔で実施した．観察第2日から15日までは毎日1回行った．体重は全例について，投与直前，観察第2，4，8，11および15日に測定した．剖検は，観察第15日に全例をペントバルビタールナトリウム麻酔下で放血屠殺して実施した．

結果および考察

雌雄とも死亡例はなかった．

一般状態では，雄の対照群および1000 mg/kg投与群において，投与日に媒体として用いたコーン油によると考えられる粘液便の排泄が2〜3例にみられた．

体重では，雌雄の2000 mg/kg投与群の観察第2日に軽度な体重増加抑制がみられた．

剖検では，雌雄いずれの器官・組織にも変化は認められなかった．

以上の結果から，4-メトキシベンズアルデヒドのLD50値は，雌雄ともに2000 mg/kgを上回ると推定された．

文献

1)“The Merck index,” 12, ed. by S. Budavari, Merck & Co., Inc., N. J., U.S.A., 1996, p.699.
2)P. M. Jenner, Food Cosmet. Toxicol., 2, 327(1964).

連絡先
試験責任者：永田伴子
試験担当者：勝村英夫，松本浩孝，堀内伸二，三枝克彦，稲田浩子，安生孝子
(財)食品薬品安全センター秦野研究所
〒257-8523　神奈川県秦野市落合729-5
Tel 0463-82-4751Fax 0463-82-9627

Correspondence
Authors:Tomoko Nagata(Study director)
Hideo Katsumura, Hirotaka Matsumoto, Shinji Horiuchi, Katsuhiko Saegusa, Hiroko Inada, Takako Anjo
Hatano Research Institute, Food and Drug Safety Center
729-5 Ochiai, Hadano-shi, Kanagawa, 257-8523, Japan
Tel +81-463-82-4751Fax +81-463-82-9627